它们的配制方法如下:

磷钨酸、磷钨酸钠、磷钨酸钾溶液通常用双蒸水或磷酸缓冲液配制成1%~3%的溶液，使用时应用1 mol/L氢氧化钠溶液将负染色液的pH值调至6.4~7.0或实验所需的值。 醋酸铀:通常使用双蒸水配制成0.2%~0.5%水溶液(pH4.5)。醋酸铀染色液应是新鲜的，最好使用前配制。醋酸铀溶解需15~30分钟，在黑暗中能稳定几小时，使用前用1mol/L的氢氧化钠溶液将pH值调至4.5。 甲酸铀:用双蒸水配制成0.5%~1%水溶液，pH值为3.5，使用时用1mol/L的氢氧化钠溶液将pH值调至4.5~5.2。 钼酸铵:用双蒸水配制成2%~3%水溶液，使用时用醋酸铵将pH值调至7.0~7.4。钼酸铵对有界膜的生物材料具有特别良好的染色值。 [编辑]

悬滴法 用一根细滴吸管吸一滴样品悬液滴在有膜的铜网上，滴样时要防止铜网被液体吸到管上来或翻转而被污染。如果用Formvar膜时，在制好膜后，可以直接在粘于滤纸上的铜网进行负染色操作。如果用碳膜时，要用镊子夹着铜网，滴液后静置数分钟，然后用滤纸从铜网边缘吸去多余的液体，滴上负染色液，染色1~2分钟用滤纸吸去负染色液，再用蒸馏水滴在铜网上洗1~2次，用滤纸吸去水，待干后可用于电镜观察。干燥时，由于表面张力的作用，某些敏感的材料可能受到损伤，可用戊二醛或四氧化锇预固定。预固定在滴样之后进行。

喷雾法 将染色液和悬液样品等量混合，用特制的喷雾器喷到有膜的铜网上，待干后可用于电镜观察。喷雾法的优点是雾滴较小，分布均匀，不易凝结成块。但操作较麻烦，溶液混合时易产生沉淀，并且需要耗费较多的样品和染色液，尤其容易造成病毒扩散，故此法不常用。

漂浮法 先将带有支持膜的铜网在悬液样品的液滴上漂浮(有支持膜的那面向下)，然后再在负染色液的液滴上漂浮。在漂浮期间，样品和染色液被吸附在铜网的支持膜上，漂浮时间与悬滴法相近。

一个理想的负染样品的图像应是均匀的，在一万倍的放大倍率下，图像出现一些薄薄的染色斑块，其特点是没有明显的边缘，染色斑由中央向边缘由深到浅，有一个逐渐变化的过程，如同中国水墨画的润色一样。在3~4万倍观察时则可见到反差良好而柔和的生物结构。而与此相反，黑白截然分明，缺乏由浅到深的中间色调，或在明亮的载网上出现颗粒性团块，则是染色失败的表现。因此，虽然负染色方法简单，但要获得理想的负染色效果和实验的重复性却不大容易。下列因素在操作中需加以注意: