博远微朗 - Vision Precision Instruments
某些负染色剂及其pH参考表
负染色剂
浓度(%)
pH值
缓冲液
磷钨酸钾
2
6.0~7.0
醋酸铵
醋酸铀
0.1~1
4.0~5.2
无
甲酸铀
0.5~1
钼酸铵
2~3
6.0~8.0
钨酸锂
6.0~7.5
硼酸钨钠
5.5~7.0
不同的样品要求不同的pH值，因此，在具体应用时，不要生搬硬套，而应当做必要的摸索。
染色的时机
染色的时机十分重要。滴染色液的时机一般既不要在生物样品完全干了之后，更不应在载网上尚有肉眼可见的水珠时就着手染色。恰当的时机应是用滤纸吸去悬液之后稍待片刻，当肉眼看不出残留的液体时滴加染色液。如果载网上尚有悬液残存时就进行染色，或者完全干后再染色，效果都不佳。
负染色引起的缺陷
负染色的应用，尤其有助于用电镜研究小的、游离的悬浮物，如病毒，细胞器，如叶绿体，线粒体等。负染色方法染色本身，染色液的溶剂、离子组成、亲水性、pH值和干燥情况的变化都可引起缺陷。一种比较常见的缺陷是表现为白色的小球(图ref{Fig-Negtive-Flaw})。在进行病毒形态鉴定观察分析时，这种小泡的存在很容易误导，尤其很容易被当作球状病毒。一般样品中的悬浮介质或染色液的pH值偏低时比较容易导致这种缺陷发生。
